标准曲线法测定模拟尿液中葡萄糖的含量

一、实验目的

1、学习比浊计的原理及使用方法；

2、理解标准曲线的含义；

3、利用标准曲线测定模拟尿糖含量；

4、掌握比浊计测模拟尿糖含量的实验技术；

二、实验原理

糖尿病人的尿液中常带有葡萄糖，可用本尼迪特试剂检测，观察是否出现红黄色沉淀，即可判断尿液中是否含有葡萄糖。而使用比浊计可测定较准确的测出尿糖的含量。

比浊计测定法是通过测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法。在一定范围内，悬浮物质浓度与混浊度成线性关系。因本尼迪特试剂与葡萄糖反应出现红黄色沉淀，可用已知浓度的标准葡糖糖溶液，测出对应的浊度值，利用葡萄糖浓度与相应浊度的线性回归绘制出标准曲线。模拟尿糖可根据其与本尼迪特试剂反应后的浊度值从标准曲线中查出参与反应的葡萄糖浓度。若尿液中的糖含量较高超出比浊计的测量范围，需要做一定的稀释后测定。可以说，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。

三、仪器与试剂

比浊计，比浊计校准液，水浴锅，移液管，洗耳球，试管，量筒，烧杯，

本尼迪特试剂，标准葡萄糖溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg·mL-1，模拟尿液等。

四、实验步骤

1、绘制标准曲线

用移液管分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg·mL-1标准葡萄糖溶液各2mL于试管中，编号，加入2mL本尼迪特试剂，振荡混匀，热水浴2min。分别快速测其浊度值，测前需摇匀，重复3次，设计表格记录数据，取平均值并作图。

2、模拟尿糖含量测定

取2mL模拟尿液于试管中加入2mL本尼迪特试剂，振荡混匀，热水浴2min，摇匀后测其浊度值，重复3次，设计表格记录数据，取均值，在已经得到标准曲线中查到模拟尿液中的葡萄糖含量。

五、结果与分析

1、在空白处设计绘制标准曲线的相关数据记录表1；

2、根据表1数据，在空白处画出标准曲线图1；

3、在空白处设计模拟尿液中葡萄糖含量测定数据记录表2；

五、结果与分析

表1绘制标准曲线的相关数据

图1标准曲线

表2 模拟尿液中葡萄糖含量测定